微生物遗传育种，离不开基因工程，要应用基因工程就必须先了解质粒。刚入行的朋友开始学习吧，这篇文章主要针对初学者，有问题请留言。

1.质粒

凡游离于原核生物核基因组以外，具有独立复制能力的小型、共价、闭合、环状的dsDNA分子，即cccDNA。通常都含有基因。

2.质粒特点

(5)遗传标记：常含有选择标记基因（如抗生素抗性基因），可以通过抗生素筛选来鉴定和分离含有质粒的细胞。

1.分子量小，便于DNA的分离和操作。

2.呈环状，使其在化学分离过程中能保持性能稳定。

3.有不受核基因组控制的独立复制起始点。

4.拷贝数多，使外源DNA可很快扩增。

5.存在抗药性基因等选择性标记，便于含质粒克隆的检出和选择。

质粒DNA序列的物理图谱，包括质粒的大小、筛选标记、多克隆位点、转录及翻译元件等信息，为我们选择质粒、了解质粒特点及应用提供了重要依据。

2.质粒图谱包含的基本要素

(1)复制起点(ori)：控制质粒复制的起始点，决定了质粒的宿主和拷贝数。原核生物DNA分子中通常只有一个复制起始点，而真核生物DNA分子则可能有多个。

2.看质粒元件箭头方向

识别质粒上的抗生素抗性基因，如AmpR、KanR等。这些标记决定了后续筛选时应该使用哪种抗生素。

4.分析多克隆位点（MCS）

仔细检查MCS上的酶切位点，了解哪些酶可以用于切割质粒以插入外源基因。同时，注意酶切位点的排列和位置，以便在构建质粒时选择合适的酶进行切割。

9.关注其他元件

查看质粒上是否存在核糖体结合位点(RBS)、终止子(Terminator)、操纵子(Operator)等元件。

10.质粒图谱上的箭头：有的箭头顺时针有的箭头逆时针，那其实是代表两条DNA链，即质粒是环状双链DNA，它的启动子等在其中一条链上，而它的抗性基因在另一条链上。

文章出自 科研实验外包   想了解更多请关注：http://www.dj-cro.com/